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抗凝血酶Ⅲ测定试剂盒的特点是什么

来源:http://www.zjikon.com/news1081418.html 发布时间:2025/12/6 10:08:00

抗凝血酶Ⅲ测定试剂盒的核心特点体现在检测原理的科学性、试剂组成的精准性、性能指标的优越性、操作流程的便捷性以及应用场景的广泛性,具体如下:


一、检测原理:发色底物法,科学可靠

抗凝血酶Ⅲ测定试剂盒采用发色底物法进行检测。在样品中加入定量的凝血酶,抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)与凝血酶形成1:1复合物,使对应的凝血酶失活。剩余的凝血酶作用于发色底物,释放显色基团,在405nm波长下测定吸光度的增加。吸光度的变化与AT-Ⅲ活性呈负相关,根据标准曲线即可计算出AT-Ⅲ的活性。这一原理科学可靠,为检测结果的准确性提供了坚实基础。


二、试剂组成:精准配比,确保效果

试剂盒的组成成分经过精心筛选和优化,包括凝血酶试剂、凝血酶底物及稀释缓冲液等。以某品牌试剂盒为例,其凝血酶试剂为25nKat冻干牛凝血酶,凝血酶底物为H-D-HHT-L-Ala-L-Arg-pNA·2AcOH,稀释缓冲液则包含Tris-HCl、NaCl、NaEDTA、肝素钠等成分。这些成分的精准配比,确保了试剂盒在检测过程中的稳定性和准确性。


三、性能指标:优越突出,满足需求

准确性:试剂盒的准确性好,灵敏度高,干扰因素少。例如,某品牌试剂盒的精密度高,CV(变异系数)<10%,样本用量少,仅需几微升样本即可完成检测。

特异性:试剂盒具有高特异性,不与其它可溶性结构类似物交叉反应。这确保了检测结果的准确性和可靠性,避免了假阳性或假阴性的出现。

重复性:试剂盒的重复性好,板内、板间变异系数均小于15%。这意味着在不同时间、不同批次进行的检测,结果都能保持一致,为临床诊断和治疗提供了可靠依据。

稳定性:试剂盒在储存和使用过程中表现出良好的稳定性。例如,某品牌试剂盒的R1、R2试剂开瓶后+2~+8℃可储存8天,AT-Ⅲ试剂盒于+2~+8℃长期储存18个月。这延长了试剂盒的使用寿命,降低了使用成本。

四、操作流程:简便快捷,易于掌握

试剂盒的操作流程简便快捷,易于掌握。一般来说,操作步骤包括样品处理、加样、温育、洗涤、显色和终止反应等。以ELISA检测试剂盒为例,其操作步骤如下:


样品处理:收集血清、血浆等样本,并进行适当处理(如离心分离血清)。

加样:往预先包被抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体。

温育:用封板膜封板后置37℃温育一定时间(如30分钟)。

洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置一定时间后弃去,如此重复多次,拍干。

显色:每孔先加入显色剂A,再加入显色剂B,轻轻震荡混匀,37℃避光显色一定时间(如15分钟)。

终止反应:每孔加终止液,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值),计算样品浓度。

五、应用场景:广泛多样,满足临床需求

抗凝血酶Ⅲ测定试剂盒在临床上有广泛的应用场景。它可用于遗传性抗凝血酶缺乏症、血栓前状态和血栓性疾病、合成减少(如严重肝病)等疾病的诊断和监测。例如:


遗传性抗凝血酶缺乏症:由AT基因突变引起,呈常染色体显性遗传规律,大多伴有家族史。手术、创伤和感染为先天性AT-Ⅲ缺乏症血栓形成的主要诱因。通过检测AT-Ⅲ活性,可以辅助诊断该疾病。

血栓前状态和血栓性疾病:如DIC高凝期、心肌梗死、心绞痛、脑血管病变、妊娠、深静脉血栓形成、肾病综合征、肿瘤等。在这些疾病状态下,血液抗凝作用减弱,AT-Ⅲ活性降低。通过检测AT-Ⅲ活性,可以评估患者的凝血状态,为治疗提供依据。

合成减少:如严重肝病等。肝脏是合成AT-Ⅲ的主要场所,严重肝病时AT-Ⅲ合成减少,活性降低。通过检测AT-Ⅲ活性,可以辅助诊断肝病并评估其严重程度。